ABSTRACT Bowdichia virgilioides Kunth is a medium size tree used in folk medicine and in furniture manufacturing which makes it a target of extractive processes. The aim of this work was to evaluate the endogenous content of polyamines, amino acids, and sugars in seedlings of Bowdichia virgilioides that presented or not the development of spontaneously differentiated vegetative propagules in their roots. An average of thirty percent Bowdichia virgilioides in vitro growing plants cultivated in MS basal medium without growth regulators presented the differentiation of vegetative propagules. It was noted the propagules units presents embryo-like structures (globular - to leaf-shaped features) and these plants showed a compromised development when compared to the plants that do not presented these morphogenetic structures. Total sugars and amino acids content was significantly higher in the roots of plants with the vegetative propagules. With regard to polyamines content, there was no statistical difference, for spermine and spermidine. However, higher levels of putrescine were found in plants developing vegetative propagules. In this way, these results showed that this event are related to the amino acids, sugars and polyamines, mainly putrescine content.

Resumo Este estudo objetivou avaliar a influência das citocininas durante o estágio de multiplicação in vitro e a combinação entre carvão ativado com o ácido indol-3-butírico (AIB) durante o enraizamento in vitro de Handroanthus impetiginosus. Para a multiplicação in vitro, os segmentos nodais dos brotos obtidos a partir do estabelecimento de plântulas in vitro foram inoculados em meio de cultura Woody Plant Medium (WPM), com e sem as seguintes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (KIN) e tidiazuron (TDZ): 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 e 8,0 µmol L-1. Para o enraizamento in vitro, brotos foram inoculados em meio WPM contendo combinações entre AIB (1,0; 3,0; 6,0 e 9,0 μmol L-1) e carvão ativado (1,0; 2,0 e 3,0 g L-1), bem como suas ausências no meio de cultura. O maior número de brotos e gemas foi alcançado após usar 8,0 μmol L-1 de TDZ, enquanto que o melhor enraizamento ocorreu após a adição de 2,0 g L-1 de carvão ativado, independente da concentração de AIB. Nossos resultados mostram que usar TDZ em níveis adequados para o estágio de multiplicação in vitro seguido pelo uso de 2,0 g L-1 de carvão ativado para obter brotos bem enraizados é eficiente para a micropropagação de ipê-roxo de maneira rápida e com baixo custo, além de fornecer conhecimento sobre como manter esta espécie ameaçada de extinção em um ambiente in vitro podendo ajudar outros estudos de conservação.

Abstract This study aimed to evaluate cytokinin influence during in vitro multiplication stage and activated charcoal in combination with indole-3-butyric acid (IBA) during in vitro rooting of Handroanthus impetiginosus. For in vitro multiplication, nodal segments of shoots obtained from in vitro seedlings establishment were inoculated in Woody Plant Medium (WPM), with and without the following concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP), kinetin (KIN) and thidiazuron (TDZ): 0.5; 1.0; 2.0; 4.0 and 8.0 µmol L-1. For in vitro rooting, shoots were inoculated in WPM containing combinations among IBA (1.0; 3.0; 6.0 and 9.0 μmol L-1) and activated charcoal (1.0; 2.0 and 3.0 g L-1), as well as their absence within culture medium. The highest number of shoots and buds was reached after using TDZ 8.0 μmol L-1, where in the best rooting occurred after adding activated charcoal 2.0 g L-1, regardless of IBA concentration. Our results show that using TDZ in a suitable level for in vitro multiplication stage followed by using 2.0 g L-1 of activated charcoal to obtain well rooted shoots is efficient for ipê-roxo micropropagation in a low cost-manner and quickly, besides providing knowledge about how to keep this threatened extinction species in an in vitro environment, which may help other conservation studies.

RESUMO O cultivo protegido tem aumento ao longo dos anos, havendo necessidade de ampliar as pesquisas que comprovem benefícios da utilização de agrofilmes fotosseletivos. A escolha do material para a cobertura da casa de vegetação é fator decisivo para o desenvolvimento da cultura e produção. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos agrofilmes de cor azul e o difusor na produção de diferentes cultivares de tomateiro de hábito de crescimento indeterminado no sistema hidropônico-NFT. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x3 (dois ambientes e três cultivares): dois tipos de agrofilme (azul e difusor) e 3 cultivares (Monterrey, Arendell e Totalle), sendo cada parcela constituída por 30 plantas por tratamento, com quatro repetições. Utilizaram-se mudas comerciais de tomateiro de hábito de crescimento indeterminado enxertadas em porta-enxerto cultivar Shincheonggang. Foram avaliadas durante a pesquisa a condutividade elétrica, intensidade da radiação dentro da casa de vegetação, trocas gasosas, sólidos solúveis, teor de licopeno, pH e produção de frutos. Conclui-se com a pesquisa que a quantidade de radiação que passa pelo agrofilme difusor favorece um aumento em torno de 18% as trocas gasosas, 12% o teor de licopeno e 9,4% a produtividade da cultura do tomate.

ABSTRACT Protected cultivation has increased over the years. More studies on the benefits of using photoselective agrofilms are necessary. The choice of material to cover the greenhouse is a decisive factor for crop development and production. The aim of this study was to evaluate the effect of diffuser and blue-colored agrofilms on the production of different tomato cultivars of indeterminate growth habit under NFT hydroponic system. A completely randomized design in a 2x3 factorial scheme (two environments and three cultivars) was used: two agrofilm types (blue and diffuser) and 3 cultivars (Monterrey, Arendell and Totalle). Each plot consisted of 30 plants per treatment, with four replicates. Commercial tomato seedlings of indeterminate growth habit grafted on rootstock cultivar (Shincheonggang) were used. During the experiment, the electrical conductivity, intensity of radiation inside the greenhouse, gas exchange, soluble solids, lycopene content, pH and fruit production were evaluated. We concluded that the amount of radiation transmitted through the diffuser favors an increase of about 18% in gas exchange, 12% in lycopene content and 9.4% in tomato crop production.

Abstract The aim of this work was to evaluate the effect of Salicylic acid, 2,4-D and 2-iP on the production of total phenolic and flavonoids as well in the levels of fukugetin and 7-epiclusianone in callus of Garcinia brasiliensis zygotic embryos. For this, Bacupari callus were exposed to different concentrations (0.0; 0.1; 1; 10; 100 µM) of Salicylic acid (SA) in the presence or in the absence of 72 μM 2-iP and 28.73 μM 2,4-D. The highest concentration of total phenolic occurred in the treatment with 100 μM SA in callus subcultured in the absence of 2,4-D and 2-iP, and with 10 μM SA in callus subcultured in the presence of these regulators. Concerning flavonoids, 2,4-D and 2-iP supplementation without the presence of the SA was sufficient for the highest levels. Additionally, it was possible to identify the fukugetin and 7-epiclusianone. However, the variation in the levels was very high, especially for the fukugetin. Therefore, in most treatments, there was no statistically difference. Except for the treatment with 10 μM SA + 2,4-D and 2-iP, where there was a significant increase in 7-epiclusianone.

ABSTRACT Water erosion is one of the main environmental impacts of land use. When soil and water losses occur, nutrients essential for the growth and maintenance of plants are removed, with harmful outcomes on the sustainability of agriculture and the environment. In addition, they lead to other deleterious effects, such as sedimentation and eutrophication of water bodies. Estimation of soil losses due to water erosion in sub-basins is essential for prediction of soil degradation, especially in areas of semi-intensive cultivation, such as coffee fields. Thus, the aim of this study was to estimate soil losses in relation to the limit of soil loss tolerance in Oxisols (Latossolos Vermelhos Distróficos) under coffee cultivation. This study was conducted from March 2015 to January 2017 in the Córrego da Laje Hydrographic Sub-basin in the municipality of Alfenas in the southern region of Minas Gerais, southeastern Brazil. Soil losses due to water erosion were estimated from the revised universal soil loss equation and compared to soil loss tolerance. Morphological, physical, and chemical properties of the soil were used, as well as geoprocessing techniques, remote-sensing images, and data from the literature. The results show potential soil losses from 0.01 to 18.77 Mg ha-1 yr-1, with an average of 1.52 Mg ha-1 yr-1. The soil loss tolerance ranged from 5.19 to 5.90 Mg ha-1 yr-1, with 7.35 % of the area having larger losses. Areas with steeper slopes and no sustainable practices have soil losses above the tolerance level and are thus a priority for adoption of measures to mitigate erosive effects. The revised universal soil loss equation enabled water erosion modeling and identification of areas with the highest rates of potential soil loss in watersheds.

RESUMO O biodiesel se destaca como sendo alternativa para a diminuição do uso de derivados do petróleo, contudo sua produção acarreta em um grande volume de subprodutos gerados. O trabalho foi realizado no Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Sul de Minas Gerais - campus Machado, com o objetivo de avaliar os impactos da disposição da glicerina bruta em solo agrícola sobre a atividade microbiana e o desenvolvimento vegetal. Para a análise da atividade microbiana, um experimento foi desenvolvido em laboratório, com delineamento inteiramente casualizado, cinco tratamentos e cinco repetições. Amostras de 100 g de solo foram incubadas por 36 dias com quatro concentrações de glicerina bruta, a saber: 0; 48,7; 146,1; 292,2 L ha-1, além da ausência de solo e glicerina. Durante este período, realizaram-se 11 avaliações do volume de CO2 liberado, em cada amostra. Para avaliar os efeitos da glicerina bruta sobre o desenvolvimento vegetal, outro experimento foi desenvolvido em laboratório utilizando aquênios de picão preto. Foi utilizado delineamento em blocos casualizados em esquema fatorial 4x2, com cinco repetições, as mesmas concentrações de glicerina e duas origens do resíduo (laboratório e usina produtora de biodiesel). Para doses de até 143,83 L ha-1, a glicerina bruta estimulou a atividade microbiana do solo, sendo indicativo positivo para estudos futuros em relação a sua aplicação em solos agrícolas. As aplicações de glicerina reduziram a protrusão radicular do picão-preto, mesmo nas menores doses. Os resíduos possuem teores de Na+ que limitam sua aplicação em solos agrícolas.

ABSTRACT Biodiesel stands out as an alternative for petroleum-based products, but its production generates a large amount of by-products. This study was carried out at the Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Sul de Minas Gerais, Campus Machado, with the objective of evaluating the impacts of the disposal of crude glycerin on agricultural soil and its microbial activity as well as in plant development. An experiment with a completely randomized design, five treatments, and five replicates was developed in the laboratory to analyze microbial activity. Soil samples of 100 g were incubated for 36 days with concentrations of crude glycerin, namely: 0; 48.7; 146.1; 292.2 L ha-1. Besides these four treatments, flasks without soil and glycerin have composed one more treatment. During this period, the CO2 volume released in each sample was evaluated 11 times. Another experiment was developed in the laboratory with hairy beggarticks’ achenes to evaluate crude glycerin effects on plant development. A randomized complete block design was used in a 4x2 factorial scheme, with five replicates, the same glycerin concentrations, and two glycerin sources (laboratory and biodiesel plant-unit). Crude glycerin stimulated soil microbial activity for doses of up to 143.83 L ha-1, being a positive indicative for future studies on its application to agricultural soils. Glycerin applications reduced the hairy beggarticks’ root protrusion, even at the lowest doses. Residues have Na+ contents that limit their application in agricultural soils.

RESUMO A micropropagação em sistemas de biorreatores é considerada como uma forma de reduzir os custos de produção por meio do escalonamento de automatização do processo. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um protocolo eficiente de produção de mudas de Eucalyptus camaldulensis em diferentes tipos de sistema, incluindo biorreator de imersão continua e temporária. Para isso, meristemas apicais (1 mm) e meristemas apicais com tecido adjacente (2,5 mm) foram usados como explantes iniciais. Esses tecidos foram cultivados, por 60 dias, em meio de cultura suplementado com 1 mg L-1 de ácido indolacético (AIA) e 0.32 mg L-1 de benzilaminopurina (BAP). Após 60 dias, os meristemas com tecidos adjacentes foram transferidos para biorreatores de imersão contínua ou temporária e mantidos no escuro ou sob condições controladas de luminosidade. Para verificar o efeito da fonte de explante na multiplicação em biorreator foram testados explantes subcultivados de meristemas multiplicados em meio de cultura semissólido e meristemas multiplicados em biorreator de imersão contínua e mantidos no escuro. Despois de estabelecer esses parâmetros, os experimentos de multiplicação foram realizados em biorreatores de imersão contínua e temporária. Os explantes multiplicados foram enraizados em meio de cultura MS suplementado com 0, 2, 4, 8 e 20 mg L-1 de ácido indolbutírico (AIB) e mantidos no escuro ou sob condições controladas de luminosidade. Depois do enraizamento as plantas foram aclimatizadas em câmara de nebulização. Os meristemas com tecidos adjacentes favoreceram um maior número de gemas/explantes. O biorreator de imersão contínua e mantido no escuro promoveu maior número de brotações e maior taxa de multiplicação e o melhor enraizamento ocorreram no meio de cultura isento de auxina, mantido no escuro por 15 dias ou o meio de cultura suplementado com auxina, mantido na luz apresentando 100% de enraizamento. A aclimatização do Eucalyptus camaldulensis foi eficiente com taxa de sobrevivência de 76%. Portanto, foi possível desenvolver um método eficiente de micropropagação em biorreator para a produção de mudas Eucalyptus camaldulensis em larga escala.

ABSTRACT The plant micro-propagation in bioreactor systems is regarded as one way to reduce cost by automation and production scheduling. This research was carried out in order to obtain an efficient procedure for clone production of Eucalyptus camaldulensis on different types of bioreactor including continuous and temporary immersion bioreactor. To do so, the apical meristems (1 mm) and the apical meristems with adjacent tissue (2,5 mm) were used as initial explants. These tissues were cultured, for 60 days, in semisolid culture medium supplemented with 1 mg L-1 indole acetic acid (IAA) and 0.32 mg L-1 benzylaminopurine (BA). After 60 days, the meristems with adjacent tissue were transferred to a continuous immersion bioreactor and maintained in dark or light conditions. In order to verify the effect of the explant source on bioreactor multiplication, the explants subcultured from meristems multiplied in semisolid culture medium and the meristems multiplied in continuous immersion bioreactor were tested and maintained in dark conditions. After establishing this parameters, the multiplication experiments were carried out in continuous and temporary immersion and the multiplied explants were then rooted in MS medium supplemented with 0, 2, 4, 8 and 20 mg L-1 indole butyric acid (IBA) and kept in the dark or under controlled lighting conditions. After that, the rooting the plants were acclimatized in mist chamber. The meristem with adjacent tissue favored a greater number of buds/explants. The continuous immersion bioreactor in the dark provided higher shoots number and multiplication rate. The rooting was better on culture medium without auxin and kept in the dark for 15 days or the culture medium supplemented with auxin and maintained under light with 100% plantlet rooting. The Eucalyptus camaldulensis acclimatization was efficient, with high survival rate (76%). It was possible to establish the procedure for bioreactor micro-propagation of Eucalyptus camaldulensis large-scale clones.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do cultivo de plantas de copo-de-leite (Zantedeschia aethiopica) em sistema hidropônico, no crescimento vegetativo, no teor de nutrientes na parte aérea e nas trocas gasosas. Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial triplo (2x2x2), com oito tratamentos, três repetições e oito plantas por parcela. Os tratamentos consistiram de duas dimensões de espuma fenólica (2,5x2,5x2,5 e 5,0x5,0x3,8 cm, expressas em altura x comprimento x largura), duas soluções nutritivas e dois perfis hidropônicos (100 e 150 mm). As plantas de copo-de-leite foram cultivadas em sistema hidropônico fluxo laminar de nutriente (NFT) e apresentaram teores de nutrientes na parte aérea, na seguinte sequência decrescente: K>N>Ca>P>S>Mg para macronutrientes e Fe>Mn>Zn>B>Cu para micronutrientes. Plantas de copo-de-leite cultivadas em sistema hidropônico NFT, em espuma fenólica de 5,0x5,0x3,8 cm e em perfil hidropônico de 150 mm, apresentam maior acúmulo de massa de matéria seca na parte aérea e no rizoma, bem como maiores taxas fotossintéticas, independentemente da solução nutritiva.

Abstract: The objective of this work was to evaluate the effect of growing calla lily plants (Zantedeschia aethiopica) in a hydroponic system on vegetative growth, nutrient content in shoots, and gas exchange. A completely randomized design in a triple factorial arrangement (2x2x2) was used, with eight treatments, three replicates, and eight plants per plot. The treatments consisted of two dimensions of phenolic foam (2.5x2.5x2.5 and 5.0x5.0x3.8 cm, expressed as height x length x width), two nutrient solutions, and two hydroponic profiles (100 and 150 mm). The calla lily plants were grown in a nutrient film technique (NFT) hydroponic system and presented nutrient content in the shoots in the following decreasing order: K>N>Ca>P>S>Mg for macronutrients and Fe>Mn>Zn>B>Cu for micronutrients. Calla lily plants grown in a NFT hydroponic system, in the phenolic foam of 5.0x5.0x3.8-cm dimensions and in the hydroponic profile of 150 mm, show greater dry matter accumulation in shoots and bulbs, as well higher photosynthetic rates, regardless of nutrient solution.

Garcinia brasiliensis, popularly known as Bacupari, is native to the Amazon and commonly used in folk medicine for its therapeutic properties. This plant is rich in bioactive compounds like benzophenones. However, there are no works about the in vitro establishment and achievement of secondary metabolites in this plant. Thus, the aim of this work was to determine the growth curve and to perform the biochemical and phytochemical analyses in calli obtained from the procambium segments of Bacupari. The growth curve of calli followed a sigmoidal pattern, with four distinct phases (lag, exponential, linear, deceleration). Total soluble sugars were higher on the inoculation day and the reducing sugars on the 20 th day. Amino acids increased from the 60 th day up to the stabilization on the 120 th day. The protein content varied, but it seemed to be related to the amino acids metabolism. The phytochemical screening showed the presence of phenolic and flavonoid compounds in the calli and the HPLC analysis allowed the identification of Fukugetin, Guttiferone A and 7-epiclusianone.

Lodo de esgoto é o resíduo obtido após o tratamento dos esgotos municipais. Em decorrência dos elevados teores de matéria orgânica e de nutrientes, é possível utilizar o lodo, de forma sustentável, como fertilizante agrícola e condicionador de solos. Todavia, além de patógenos e de compostos orgânicos voláteis, esse resíduo pode conter ainda metais pesados que podem ser acumulados e contaminar as culturas agrícolas e a cadeia trófica. Assim, neste trabalho, objetivou-se avaliar as alterações na fertilidade de um Latossolo Vermelho distrófico e na disponibilidade de metais pesados decorrentes da aplicação de lodo de esgoto. Foi avaliado se a matéria orgânica fornecida ao solo com aplicações elevadas de lodo deverá, em razão da formação de compostos insolúveis, diminuir a disponibilidade dos metais pesados do solo. Para tanto, foi conduzido experimento em vasos de polietileno, com a aplicação do lodo no solo nas concentrações equivalentes a 60, 120 e 180 t ha-1, e um tratamento controle sem lodo, com quatro repetições, em delineamento inteiramente casualizado, utilizando alface como planta teste. Os resultados indicam que o lodo de esgoto promoveu o aumento dos teores de matéria orgânica, da capacidade de troca catiônica (CTC) e de nutrientes no solo e ainda melhorou o desenvolvimento das plantas até a concentração de 120 t ha-1. A disponibilidade dos metais pesados, no entanto, foi reduzida nos tratamentos a partir de 120 t ha-1 de lodo.

Sewage sludge is the solid residue obtained from urban sewage treatment plants. It is possible to use the sludge in a sustainable way as fertilizer and as soil conditioner due to its high levels of organic matter and nutrients. Besides pathogens and volatile organic compounds, the residue may also contain heavy metals which may accumulate and contaminate crops and the food chain. The aim of this study was evaluates the changes in the fertility of dystrophic Red Latosol and in the availability of heavy metals following application of sewage sludge. It was assessed whether organic matter supplied to the soil as large amounts of sewage sludge would decrease availability of heavy metals in the soil due to of insoluble compounds formation. From this, an experiment was carried out in polyethylene pots using lettuce plant for test. Sewage sludge were applied to the soil in concentrations equivalent to 60, 120 and 180 t ha-1, and a control without sludge, in four replicates, in a completely randomized design. The results show that sewage sludge led to an increase of organic matter contents, of the cation exchange capacity (CEC) and of nutrients found in the soil. It also improved plant growth up to a concentration of 120 t ha-1. Availability of heavy metals, however, was reduced in sludge concentrations starting with 120 t ha-1.

A cultura de tecidos pode contribuir na propagação de várias espécies de interesse comercial, como as bromeliáceas. Objetivou-se avaliar o tipo e a concentração de auxinas na rizogênese in vitro e ex vitro da bromélia Neoregelia concentrica. Brotos de N. concentrica foram induzidos em meio de cultivo com 15,0 µM de 6-benzilaminopurina, por 80 dias, com posterior subcultivo em meio isento de fitorreguladores, por 45 dias. Na rizogênese in vitro, os brotos foram cultivados em meios suplementados com ácido indol-3-butírico (AIB) ou ácido-naftaleno-acético (ANA), nas concentrações de 0,0 µM; 1,0 µM; 2,0 µM; 3,0 µM; e 4,0 µM. Para a rizogênese ex vitro, os brotos tiveram suas bases imersas, por 60 minutos, em solução de AIB ou ANA, nas concentrações de 0,0 µM; 5,0 µM; 10,0 µM; e 15,0 µM. Após imersão, os brotos foram plantados em bandejas plásticas contendo vermiculita. Ao final de cada método de rizogênese, foi realizada a análise de parâmetros fitotécnicos. Na rizogênese in vitro, observou-se maior número de raízes quando os brotos foram cultivados com concentrações superiores a 1,0 µM de ANA, em relação ao AIB. Contudo, a percentagem de enraizamento diferiu apenas aos 30 dias de cultivo in vitro, com maior indução de raízes nos brotos cultivados com ANA. Aos 60 dias, o enraizamento foi superior a 90% e estatisticamente semelhante em todos os tratamentos. Na rizogênese ex vitro, observou-se melhor formação do sistema radicular quando aplicados 5,0 µM de AIB, com as maiores médias para enraizamento e número de raízes.

The tissue culture can contribute to the propagation of several economic species, such as the bromeliads. This research aimed at evaluating the auxins type and concentration in the in vitro and ex vitro rhizogenesis of Neoregelia concentrica bromeliad. N. concentrica shoots were induced in a growth medium with 15.0 µM of 6-benzylaminopurine, for 80 days, followed by sub-cultivation in phytoregulator-free medium, for 45 days. In the in vitro rhizogenesis, the shoots grew in a medium supplemented with indole-3-butyric acid (IBA) or naphthalene-acetic acid (NAA), at the concentrations of 0.0 µM, 1.0 µM, 2.0 µM, 3.0 µM and 4.0 µM. In the ex vitro rhizogenesis, the bases of shoots were immersed, for 60 minutes, in IBA or NAA solutions, at the concentrations of 0.0 µM, 5.0 µM, 10.0 µM and 15.0 µM. After immersion, the shoots were planted in plastic trays with vermiculite. At the end of each rhizogenesis method, the phytotechnical parameters analysis was carried out. For the in vitro rhizogenesis, a higher number of roots were observed when the shoots were cultivated in concentrations higher than 1.0 µM of NAA, when compared to the IBA. However, the rooting rate differed only at 30 days after the in vitro growth, with a higher root induction in the shoots grown with NAA. At 60 days, the rooting rate was higher than 90% and statistically similar in all treatments. In the ex vitro rhizogenesis, a better formation of the rooting system was observed when 5.0 µM of IBA was applied, with higher rooting averages and number of roots.

O Eucalyptus destaca-se no cenário silvicultural mundial devido à sua adaptabilidade, crescimento rápido e produção de fibra de baixo custo e com alta qualidade. O melhoramento convencional do gênero é dificultado, principlamente, pelo seu longo ciclo de vida, tornando a transformação genética importante ferramenta para esse propósito. Esse processo requer o desenvolvimento de protocolo eficiente de progagação in vitro para indução, regeneração e seleção que permita a obtenção de plantas transgênicas a partir de grupos de células transformadas. Os objetivos deste trabalho foram avalair a formação de calos e otimizar o protocolo de transformação genética de folhas e calos através da infecção por A. tumefaciens. Para a formação de calos foram avaliados dois meios de cultura: meio de cultura MS supplementado com auxina e citocinina (M1) e meio de cultura MS com concentração de nitrogênio reduzida e suplementado com auxinas, citocininas e água de coco (M2). Para estabelecer o protocolo de transformação genética de E. camaldulensis, as folhas foram expostas à técnica de agrobiobalística, utilizando-se o bombardeador com micropartículas para realizar ferimentos nos tecidos; e A. tumefasciens EHA 105 contendo o vetor pCambia 3301 (35S::GUS::NOS) para a transferência do gene, enquanto para a transformação genética dos calos estes foram somente infectados com A. tumefasciens. Em ambos os experimentos foi avaliada a influência de diferentes períodos de infecção. O meio de cultura M2 promoveu os melhores valores de volume, massa seca e massa fresca. A transformação genética de folhas através da técnica de agrobiobalística foi efetiva, sendo possível observar a expressão transiente do gene gus, mas não houve diferenças significativas entre os períodos de infecção (4, 6 e 8 min). Os calos infectados por 15 e 30 min com A. tumefasciens também apresentaram expressão transiente do gene gus quando foram tranferidos para meio de cultura de regeneração e seleção e apresentaram formação de brotos.

Eucalyptus stands in the setting of worldwide forestry due to its adaptability, rapid growth, production of high-quality and low cost of wood pulp fibers. The eucalyptus convetional breeding is impaired mainlly by the long life cycle making the genetic transformation systems an important tool for this purpose. However, this system requires in vitro eficient protocols for plant induction, regeneration and seletion, that allow to obtain transgenic plants from the transformed cell groups. The aim of this work was to evaluate the callus formation and to optimize the leaves and callus genetic transformation protocol by using the Agrobacterium tumefaciens system. Concerning callus formation, two different culture media were evaluated: MS medium supplemented with auxin, cytokinin (M1) and the MS medium with reduced nitrogen concentration and supplemented with auxin, cytokinin coconut water (M2). To establish the leave genetic transformation, those were exposed to agrobiolistics technique (gene gun), to tissue injury, and A. tumesfasciens EHA 105 contening the vetor pCambia 3301 (35S::GUS::NOS), for gene transference and to establish the callus transformation thoses were exposed only to A. tumefasciens. For both experiments, the influence of different infection periods was evaluated. The M2 medium provided the best values for callus sizea and fresh and dry weight. The leaves genetic transformation using the agrobiolistics technique was effective, the gus gene transient expression could be observed. No significant differences were obtained in the infection periods (4, 6 and 8 minutes). The callus genetic transformation with A. tumefaciens also promotend the gus gene transient expression on the callus co-cultiveted for 15 e 30 minutes. The transformed callus was transfered to a regeneration and selection medium and transformed plants were obtained.

The objective of this work was to elucidate the growth curve of Eucalyptus camaldulensis Dehn. calli analyzing their anatomical modifications. A sigmoid aspect of the growth curve of the calli fresh matter was observed, with five different phases (lag, exponential, linear, deceleration and decline). In the lag phase, the highest growth percentage 87%, was observed, which reduced during the evaluation period to 17% in the linear phase. As for the anatomical analyses, cellular multiplications was observed during the lag and exponential phases and increase in cell size during the linear phase, promoting the calli volume growth and the establishment of the globular conformation.

Este trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar morfologicamente e ultra-estuturalmente calos (scalp method) de bananeira. Genótipos de bananeira, cv. Prata anã, cultivadas in vitro, foram utilizados para indução de meristemas na base das folhas e formação de estruturas conhecidas como scalp, que foram transferidas para meio ZZs. Os calos obtidos foram caracterizados morfológica e ultra-estruturalmente. Para as análises ultra-estruturais, foram coletadas, fixadas em Karnovsky e preparadas cinco amostras, que foram analisadas em microscópio eletrônico de varredura e de transmissão. Foi verificado formação de 3 tipos de calos (Tipo 1- calo transparente aquoso; Tipo 2- calo com glomérulos amarelos menores; Tipo 3- calo com glomérulos amarelos maiores). A análise por MEV mostrou que os calos Tipo1 apresentaram células alongadas; os calos Tipo 2 e Tipo 3 apresentaram células com formato isodiamétrico que condizem com características de calos embriogênicos. A análise por MET mostrou que os calos Tipo1 apresentaram parede delgada, grande quantidade de pequenos vacúolos e citoplasma disperso. Os calos Tipo 2 apresentaram citoplasma denso, vacúolos grandes e presença de mitocôndrias. Os calos Tipo 3 apresentaram parede espessa e espaços intercelulares. Assim, os calos Tipo 2 evidenciam características de calos embriogênicos.

This work was carried out to characterise morphologically and ultrastructurally the banana callus, obtained from the scalp method. Genotypes of banana, cv. Prata anã, cultivated in vitro were used to induce meristems at the leaf base; subsequently, structures known as scalps were formed. For ultrastructural analysis, five samples of callus were collected, fixed in Karnovsky solution and analysed by scanning electron microscope (SEM) and transmission electron microscope (TEM). The formation of three types of callus was observed: Type 1 - transparent watery callus, Type 2 - yellow callus with small clusters, Type 3 - yellow callus with large clusters. SEM analysis showed that Type 1 callus cells were elongated and that Type 2 and Type 3 callus cells were isodiametric, which is a characteristic of embryogenic cells. The TEM analysis showed that Type 1 callus cells had thin walls, a large number of small vacuoles and dispersed cytoplasm. The Type 2 callus cells showed dense cytoplasm, large vacuoles and a large amount of mitochondria. The Type 3 callus cells had thick and intercellular spaces. Thus, the Type 2 callus cells had characteristics consistent with embryogenic callus cells.

Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência do tipo de vedação e substrato na pré-aclimatização e os aspectos sintomatológicos na aclimatização de Ipê-roxo. Para pré-aclimatização, plantas de Ipê-roxo obtidas in vitro por meio de cultura de embriões zigóticos foram inoculadas assepticamente em tubos de ensaio contendo diferentes tipos de vedação (algodão, tampa plástica + parafilme e tampa plástica) e diferentes substratos (ágar, vermiculita e Plantmax®) suplementados com meio de cultivo WPM acrescidos de 1 gL-1 de carvão ativado, 10 mgL-1 de ácido cítrico e 30 gL-1 de sacarose. Para a aclimatização, plantas de Ipê-roxo obtidas in vitro foram transplantadas para tubetes de 56 cm³; contendo vermiculita e Plantmax®na proporção 2:1, previamente autoclavado a 121ºC e 1 atm, por 20 minutos. Após o transplantio, as plantas foram irrigadas com diferentes concentrações do meio MS (25%, 50%, 75%, 100% e 150%), sendo utilizada como controle água destilada. Após 30 dias, foram verificados efeitos do tipo de vedação e substrato na pré-aclimatização. O algodão pode ser recomendado quando se utiliza Plantmax®ou vermiculita como substrato. Na aclimatização, verificou-se que as plantas quando irrigadas com água destilada e concentrações < 50% apresentaram sintomas de deficiência nutricional. Foram observados sintomas semelhantes com a utilização de MS em concentração igual ou superior a 100%. A concentração 75% do meio MS foi a mais eficiente na manutenção do vigor nutricional de mudas de Ipê-roxo em processo de aclimatização.

This work evaluated the influence of seal type and substrate type on pre-acclimatization, and symptomatological aspects relating to acclimatization of ipê-roxo. For the pre-acclimatization, ipê-roxo plants obtained through an in vitro zygotic embryo culture were aseptically inoculated in test tubes with different types of seal (cotton plug, plastic cap + parafilm and plastic lid) and different substrates (agar, vermiculite and Plantmax®) supplemented with a WPM culture medium with 1 gL-1 of activated charcoal, 10 mgL-1 of citric acid and 30 gL-1 of sucrose added. For the acclimatization, in vitro ipê-roxo plants were transplanted into 56-cm³plastic tubes containing vermiculite and Plantmax®at a 2:1 ratio which had been previously autoclaved at 121ºC and 1 atm for 20 minutes. Once transplanted, the plants were irrigated with different concentrations of the MS medium (25%, 50%, 75%, 100% and 150%), using distilled water as control. After 30 days, the effects of seal type and substrate type on pre-acclimatization were examined. Cotton can be recommended where Plantmax®or vermiculite is used as substrate. In the acclimatization it was noted that where plants were irrigated with distilled water and concentrations < 50% they showed symptoms of nutritional deficiency. Similar symptoms were observed when using MS medium at a concentration equal to or greater than 100%. The 75% MS concentration was found to be the most effective at maintaining the nutritional vigor of ipê-roxo seedlings in the process of acclimatization.